In this study, the cytotoxicity of commonly used local anesthetics was evaluated on odontoblasts which are essential for pulpal homeostasis in vitro. Local anesthetics, such as articaine, bupivacaine, levobupivacaine, lidocaine, mepivacaine, prilocaine, and procaine, were tested on the odontoblast cell line, MDPC-23. The concentration-and time-dependent cytotoxic effects of local anesthetics on odontoblasts were measured by MTT assay. Among local anesthetics treated for 18 h, only bupivacaine significantly showed cell death in a concentration-($LC_{50}=1.2mM$) and time-dependent manner. To confirm cell death induced by bupivacaine, the observation of cell morphology and FACS using Annexin V and propidium iodide (PI) staining were performed. As a result of Annexin V and PI staining, as well as the morphological change, only bupivacaine induced apoptotic cell death on odontoblasts when compared with levobupivacaine and lidocaine. These results suggest that bupivacaine might affect normal pulpal integrity even after uneventful local anesthesia.
NFI-C K/O 생쥐에서는 상아모세포의 분화과정에 이상이 초래되어 상아질 형성에 이상이 생기고 치근 형성이 불완전하게 이루어지는 것으로 알려져 있으나 이에 대한 명확한 기전은 잘 알려져 있지 않다. 상아모세포가 분화하여 정상적으로 상아질을 형성하기 위하여 핵과 세포질이 극성을 띠고 잘 조직화되어야 하며, 이 과정에는 다양한 세포사이 결합장치들이 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 본 연구에서는 NFI-C K/O 생쥐에서 상아질 형성에 이상이 생기는 것이 상아모세포의 형태학적 변화와 세포사이 결합장치들이 기능을 하지 못한 결과에서 기인한 것인지 알아보기 위하여, NFI-C K/O 생쥐에서 발생한 비정상적인 상아모세포들을 광학 및 투과 전자현미경을 이용하여 형태학적으로 관찰하고, Zo-1과 occludin의 발현을 면역조직화학적으로 관찰하여 세포사이 결합장치들의 분포를 확인하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 광학현미경 소견에서 NFI-C K/O생쥐의 전치부 상아모세포는 세포 극성이 상실되고, 여러 층으로 배열되어 있었으며 상아질에 많은 세포들이 함입된 것과 같은 비정상적인 상아질의 소견을 나타냈다. 반면에 NFI-C K/O생쥐의 구치부 상아모세포는 치관부에서는 잘 조직화된 소견을 보였으나 치근 형성 부위 에서는 세포 배열이 불규칙해지고 세포 극성이 상실되었다. 2. 투과 전자현미경 소견에서 NFI-C K/O생쥐 전치부의 비정상적인 상아모세포는 둥근 형태로 세포 사이 간격이 넓으며 폐쇄연접과 같은 세포사이 결합장치들이 전혀 관찰되지 않았다. 3. ZO-1의 면역조직화학적 염색에서 NFI-C K/O생쥐의 전치부 법랑모세포의 근위부와 원위부에서 ZO-1이 강하게 발현되었으나 비정상적인 상아모세포에서는 ZO-1의 발현을 관찰할 수 없었다. 4. Occludin의 면역조직화학적 염색에서 정상 생쥐의 전치부 상아모세포에서는 occludin의 발현이 관찰되었으나 NFI-C K/O생쥐의 비정상적인 상아모세포에서는 occludin의 발현이 관찰되지 않았다. 이상의 결과를 종합하여 볼 때 NFI-C의 결손은 상아모세포의 분화 이상을 초래하고 비정상적으로 상아질을 형성하는 과정에 세포사이 결합장치의 상실과 같은 형태학적인 변화의 중요한 요소로 작용하는 것으로 생각된다.
This study investigated the genes involved in the differentiation of odontoblasts derived from human dental pulp stem cells (hDPSCs). hDPSCs isolated from human tooth pulp were validated by fluorescence activated cell sorting (FACS). After odontogenic induction, hDPSCs were analyzed investigated by Alizaline red-S staining, ALP assay, ALP staining and RT-PCR. Differential display-polymerase chain reaction (DD-PCR) was performed to screen differentially expressed genes involved in the differentiation of hDPSCs. By FACS analysis, the stem cell markers CD24 and CD44 were found to be highly expressed in hDPSCs. When hDPSCs were treated with agents such as ${\beta}$-glycerophosphate (${\beta}$-GP) and ascorbic acid (AA), nodule formation was exhibited within six weeks. The ALP activity of hDPSCs was found to elevate over time, with a detectable up-regulation at 14 days after odontogenic induction. RT-PCR analysis revealed that dentin sialophosphoprotein (DSPP) and osteocalcin (OC) expression had increased in a time-dependent manner in the induction culture. Through the use of DD-PCR, several genes were differentially detected following the odontogenic induction. These results suggest that these genes may possibly be linked to a variety of cellular process during odontogenesis. Furthermore, the characterization of these regulated genes during odontogenic induction will likely provide valuable new insights into the functions of odontoblasts.
The authors has observed the effect of X-ray irradiation on the dentin matrix formation of the albino rat fetuses. The lower abdomen of the pregnant ratswere exposed to X-ray on the 9 1/2th day of gestation, respectively 150, 250 and 350 rads. The fetuses of the right sides of the same pregnant rats which were not exposed to X-ray were as controls. The results were as follows: 1) In the 150 rads irradiated fetuses, predentin formation was identical with control groups, but the arrangement of odontoblasts was distorted, subodontoblastic layer was condesed with pulp cells and blood capillaries were enlarged. 2) In the 250 rads irradiation, dentin matrix was imperfact or osteodentin was occured. Short columnar or cuboidal odontoblasts were presented and pulp cells were dispersed. Blood capillaries were cogested. 3) 350 rads irradiated fetuses showed osteodentin matrix and numerous degenerated odontoblasts. Their dental papilla showed reticular atrophy and enlarged capillary.
The purpose of this study is to evaluate the pulpal responses to the base materials such as zinc oxide eugenol cement, calcium hydroxide, zinc phosphate cement, polycarboxylate cement and glass ionomer cement. The 100 caries free dog teeth were devided into 2 groups by remaining dentin thickness (Group A: 0.4-0.6 mm, Group B: 0.8-1.0 mm) and each group were devided into 5 subgroups. The intervals of observation period are 3days, 1 week, 2 weeks, 4 weeks and 8 weeks respectively after experiment. The specimens were fixed with 10% formalin and decalcifed in 5% nitric acid. All specimens were stained with Hematoxylin-Eosin and examined histopathologically. The results were as follows. 1. In group A, atropy or hyperplasia in odontoblasts were seen in zinc oxide eugenol cement, calcium hydroxide and zinc phosphate cement. No changes in odontoblasts were seen in polycarboxylate cement and glass ionomer cement. 2. In group A, increase of predentin were seen in all experimental materials. 3. In group A, vascular congestion were seen in all experimental materials and inflammation were seen on 3 days in zinc oxide eugenol cement, 8 weeks in zinc phosphate cement and hemorrage were seen on 3 days in zinc phosphate cement. 4. In group B, changes of odontoblasts were not seen all experimental materials. 5. In group B, increase of predentin and vascular congestion were seen in all experimental materials but inflammation were not seen.
생쥐 치수내 조상아세포의 미세구조연구 중에 종종 보게되는 원형섬모의 미세구조와 이들의 가능한 기능을 다음과 같이 추정하였다. 1. 상아질형성물질을 분비하는 기능을 가진 조상아세포내 2가지 다른 형태의 원형섬모가 발견된다. 2. 조상아세포내 2개의 Basal Centriole을 가지고 있으면서 아마 중앙에는 쌍으로 된 microtuble이 없고 쌍으로 된 9개의 말초섬유를 가진 형태의 원형섬모는 조상아세포와 치수내 말초신경 사이에 일어나는 지각 기능에 관여 하는 것으로 추측된다. 3. 다른 한형태의 섬모, 즉 한개의 Centriole을 가지고 있으면서 쌍으로된 9개의 말초섬유를 가진 섬모는 조상아세포에서 분비된 상아질 형성물질을 움직이게 하는 이동가능에 관여하는 것으로 사료된다.
In order to study the morphologic changes of the unfixed odontoblasts suspended in phenol solution of several different concentrations, the author carried out the extraction of lower incisor of S-D strain rats to collect the odontoblasts, and the cells obtained were suspended immediately in saline solution. After observing the odontoblasts in fresh state, the saline solution was substituted with 0.125%, 0.25% 0.5%, 1% and 2% diluted phenol solutions. The morphologic changes were examined with phase contrast microscope at intervals of 10, 30, and 60 minutes. The results were as follows: 1. In saline solution the odontoblast showed cytoplasmic swelling, slender cytoplasmic process, thick rim nuclear membrane with increased dark contrast, and prominent nucleoli and chromatin granules with lapse of time intervals. In accordance with time intervals, blisters appeared in the supranuclear zone and increased its size and moved outward of the cytoplasmic membrane resulting detachment from the cell membrane. The phase dark cytoplasmic granules were increased in its dark contrast and in its size. 2. In 0.125% and 0.25% phenol solution, the odontoblasts and its nucleus shrunk immeidately and its contrast of cellular components was increased. With the lapse of time, the phase-dark granules in cytoplasm were aggregated, and several blisters were formed in and out of the cells. The outline of cytoplasmic membrane was also obscured. 3. In 0.5% phenol solution, the necleus shrunk at once, but soon after it revealed karyolysis accompanying dark contrast of neclear components such as nuclear membrane, nucleoli, and chromatin granules. On the contrary, the cytoplasmic granules showed aggregation and increased dark contrast, small and large blisters were formed in and out of the odontblasts and the outline of cytoplasmic membrane became obscured. 4. In 1% phenol solution, it showed shrinkage of odontblasts and its nuclei with thick rim nuclear membrane, aggregation of chromatin granules and occasional karyorrhexis. The dark contrast of cytoplasmic granules was increased and aggregated each other. But the blister formation could not be found. 5. In 2% phenol solution, it showed the shrinkage of odontoblasts and pyknotic nuclei with increased dark contrast of nucleoli and chromatin granules. The number of cytoplasmic granules was decreased by aggregation. But the blister formation could not be found as in 1% phenol solution.
Purpose : To observe the histopathological changes in the pulp tissues of mandibular molars in streptozotocin-induced diabetic rats after irradiation. Materials and Methods : The male Sprague-Dawley rats weighing approximately 250 gm were divided into four groups: control, diabetes, irradiation, and diabetes-irradiation groups. Diabetes mellitus was induced in the rats by injecting streptozotocin. Rats in control and irradiation groups were injected with citrate buffer only. After 5 days, the head and neck region of the rats in irradiation and diabetes-irradiation groups were irradiated with a single absorbed dose of 10 Gy. All the rats were sacrificed at 3, 7, 14, 21, and 28 days after irradiation. The specimen including the mandibular molars were sectioned and observed using a histopathological method. Results : In the diabetes group, capillary dilatation was observed. However, there was no obvious morphologic alteration of the odontoblasts. In the irradiation group, generalized necrosis of the dental pulp tissues was observed. Vacuolation of the odontoblasts and dilatation of the capillaries were noted in the early experimental phases. In the diabetes-irradiation group, generalized degeneration of the dental pulp tissues was observed. Vacuolation of the dental pulp cells and the odontoblasts was noted in the late experimental phases. Conclusion : This experiment suggests that dilatation of the capillaries in the dental pulp tissues is induced by diabetic state, and generalized degeneration of the dental pulp tissues is induced by irradiation of the diabetic group.
The object of this paper was to investigate the histopatological changes on dog's pulp under cavitation by irradiation of the $CO_2$ laser. The subjects were derived from four dogs, and irradiated 113.23 J/$mm^2$, 283.09 J/$mm^2$, 566.08 J/$mm^2$ in Group I, II, and III respectively. The dogs were sacrificed immediately, 24 hour, 72 hour and 1 week after $CO_2$ laser treatment. For light microscopic examination, routine H-E and PAS stains were employed. For electron microscopic observation, the teeth were fixed in 1% paraformaldehyde and 1% glutaraldehyde, decalcified teeth in 10% EDTA were stained by uranyl acetate and lead citrate. The observation was made with a Hitachi H-500 model electron microscope. The following results were obtained in this study: 1. At the early stage of the experimental sub-groups-immediately, 24 hour, 72 hour samples of Group I, II and III-coagulation necrosis and hyperemia were observed in odontoblastic and subodontoblastic pulpal layer. 2. At the 1 week sub-group of Group I, II, regenerative hyperplasia of the odontoblasts without coagulation necrosis were revealed, in addition to thickened predentin. On he other hand coagulation necrosis and atrophic change accompanying with hyperplasia were found at the 1 week sub-group of Group III. 3. Ultrastructurally, the odontoblasts appeared nuclear degeneration, vacuolar change of cytoplasmic organelles and rupture of plasma membrane at the early stage of the experimental period of all groups. 4. Under spectrohelioscopic examination, regenerative odontobalsts were seen at the 1 week specimens of Group I, II and III. 5. The pulpal response occured at 113-566 J/$mm^2$. The pathologic change of pulp tissue occured at the early experimental period but regeneration of odontoblasts could be seen after 1 week.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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