Series of experiments were conducted to determine lethal does of X-ray and Neutron on Toxoplasma gondii. strain RH and IRI. As well morphological changes of Toxoplasma gondii irradiated or not were compared by use of electron microscope. The pathogenicity test of the irradiated and nonirradiated Toxoplasma gondii was made in mice guinea-pigs, rabbits and pigs: The letahl dose of X-ray and Neutron on RH and IRI strain and the growth rate between two strains after irradiation were shown little differences. Morphological changes were not observed until 18th passage was made. After then, the growth rate was decreased apparently, and atrophied forms were frequently observed in electron microscope. Survival time of animals inoculated with irradiated strain was longer than that of animals giving non-irradiated strain, and Toxoplasma gondii were isolated from all the dead animals. But it is of interest that pigs survived after injection of Toxoplasma gondii remained health and much attempts were failed toisolate Toxplasma gondii remained health and much attempts were slaughtered them. Animals were succumbed after injection of Toxoplasma gondii without any relationship with serum titers. (HA antibody).
This study was conducted to detect the toxoplasma-specific DNA in peripheral blood collected from cats experimentally infected with Toxoplasma gondii (RH strain) and from domiciled cats by B1 gene-base polymerise chain reaction(PCR). The sensitivity of oligonucleotide primer, T-1 & T-2, designed from toxoplasma B1 gene amplification method was compared with parasite detection by mouse inoculation(MI). And also, latex agglutination test(LAT) and indirect fluorescent antibody test(IFAT) were conducted to detect the fluctuation of serum antibodies compared with the detection of toxoplasma by PCR and MI. Toxoplasma B1 gene PCR was shown consistently high sensitivity and the results obtained by PCR agreed completely with those from MI. All blood samples collected before infection with T gondii gave negative results by PCR and MI. Also, toxoplasma Bl gene PCR was not cross reaction with Neospora caninum DNA and normal cat leucocyte as controls. The toxoplasma-specific DNA was detected by PCR in blood of 5 cats experimentally infected with T gondii 6 days after infection and the detection of this specific-DNA was long lasted in blood for 64 days after infection. The detection of toxoplasma-specific DNA by PCR could be identified as few as 10 tachyzoites and the isolation of T gondii by MI could be isolated as few as 1 tachyzoite from tenfold serial dilution of T gondii with normal cat blood, respectively. In healthy domiciled cats, the toxoplasma-specific DNA and the parasite were detected and isolated in blood from 3 of 56(5.3%) cats by both PCR and MI, respectively. In the results of antibody test from the total 56 heads of healthy domiciled cats, the positive rates are 15(26.7%) by LAT and 19(33.9%) by IFAT. These results suggest that PCR detection of toxoplasma can be applied as a sensitive and specific diagnostic and research tool.
Toxoplasma gondii (Tp), RH strain, was inoculated into cultured buffy coat cells obtained from the swine blood. The main reason for adopting swine lies in the animal's unusual susceptibility to Tp, As for the culture method used in the experiment, those well proved methods practised by Cho, Merchant, Moore and Tarnvik were mainly referred to as a starting point: hence, the author's method has been turned out to be the modified or supplementary form of those methods. Observations were made on the phase of multiplication of Tp in the cytoplasm. The results obtained were as follows: 1. Better growth and multiplication of Toxoplasma gondii were noticeably observed in the swine buffy coat cell, inoculated after three-to-five day cultivation of the cell. 2. In the lapse of the observation period, there appeard Toxoplasma gondii rarely available in the earlier stage, which had been inoculated into the cell after three-to-five day cultivation. In other words, Toxoplasma gondii started to show itself in seven or eight hours after inoculation, most outstandingly noticeable between twenty four hours and forty eight hours. Thereafter the disintegration stage of Toxoplasma gondii was observed.
This study was conducted to detect the toxoplasma specific-DNA in circulating blood and organs collected from slaughtered pigs at slaughtering house and experimentally infected pigs with Toxoplasma gondii tachyzoites by polymerase chain reaction(PCR), and also PCR was applied to diagnose for acute phase of swine toxoplasmosis as a newly developed diagnostic test. The sensitivity of oligonucleotide primer, T-1 & T-2, designed from toxoplasma B1 gene amplification method was compared with Tp parasite detection by mouse inoculation(MI). On the other hand, latex agglutination test(LAT) was conducted to detect the serum antibodies comparing with the detection of toxoplasma by PCR and MI. The results obtained were summarized as follows. PCR was able to determine at the lowest level of $10^0/ml$ T. gondii in blood samples which were blended with a serial diluted T gondii in vitro. On the other hand, $10^2/5g$ of T gondii could detect from a variety of tissues including lung, diaphragm, liver, heart, spleen and brain in vitro. The primer was proved to specifically determine T gondii in blood and tissues in vitro but it did not detect Neospora caninum used as a negative control. DNA of T. gondii was effectively extracted by freezing, thawing and grinding twice both tissues mixed with T gondii in vitro and in experimentally infected pig's tissues. PCR detected specific DNA in the blood of experimentally infected pigs at 108 hrs and 120 hrs post-infection, it was the same time that the pigs showed fever and parasitaemia. In case of tissue, specific DNA was, however, detected only lung from experimentally infected pigs. Even though the duration of acute phase was from 3 to 7 days post-infection, but the latex agglutination test (LAT) results appeared from 8 days post-infection. A comparison of sensitivity in determining T gondii in blood samples between PCR and MI, PCR positive rate ranged from 25 to 33.3%, but that of MI covered from 75 to 100%.
This study was carried out to investigate antibodies against Toxoplasma gondii by Latex agglutination test from 101 slaugutered pigs and 109 cattle. In the species, 5(4.6%) out of 109 cattle and 4(4.0%) out of 101 pigs were seropositive for Toxoplasma gondii.
Toxoplasmosis is a parasitic disease caused by Toxoplasma gondii, with very few therapeutic treatment options. The choices for treatment are pyrimethamine and sulfadiazine, however their utility is limited because of drug toxicity and serious side effects. In this study, ethanol extracts of 13 traditional medicines used to treat Toxoplasma gondii were tested in vitro for their anti-Toxoplasma gondii cytotoxicity. The median effective concentration ($EC_{50}$) values for the herbal extracts ranged from 173 mg/mL to 1995.35 mg/mL. In HeLa cell, the selectivity of Alpinia oxyphylla (2.75), Mucunae Caulis (2.96), Dictamnus dasycarpus (7.52) which was higher than sulfadiazine (2.08). This indicates that Alpinia oxyphylla, Mucunae Caulis, Dictamnus dasycarpus extracts may be sources of new anti-Toxoplasma gondii compounds.
Both Plasmodium spp. and Toxoplasma gondii are important apicomplexan parasites, which infect humans worldwide. Genetic analyses have revealed that 33% of amino acid sequences of inner membrane complex from the malaria parasite Plasmodium berghei is similar to that of Toxoplasma gondii. Inner membrane complex is known to be involved in cell invasion and replication. In this study, we investigated the resistance against T. gondii (ME49) infection induced by previously infected P. berghei (ANKA) in mice. Levels of T. gondii-specific IgG, IgG1, IgG2a, and IgG2b antibody responses, $CD4^+$ and $CD8^+$ T cell populations were found higher in the mice infected with P. berghei (ANKA) and challenged with T. gondii (ME49) compared to that in control mice infected with T. gondii alone (ME49). P. berghei (ANKA) + T. gondii (ME49) group showed significantly reduced the number and size of T. gondii (ME49) cysts in the brains of mice, resulting in lower body weight loss compared to ME49 control group. These results indicate that previous exposure to P. berghei (ANKA) induce resistance to subsequent T. gondii (ME49) infection.
Toxoplasma 3 main clonal lineages are designated as type I, II, and III; however, atypical and mixed genotypes were also reported. This study was conducted for detection of Toxoplasma gondii genotypes in rats (Rattus rattus) in Riyadh region, Saudi Arabia. PCR test on T. gondii B1 gene was conducted on ELISA IgM positive samples for confirmation of the infection. However, genetic analysis of the SAG2 locus was performed to determine T. gondii genotypes using PCR-RFLP technique. PCR test on T. gondii B1gene showed that 22 (81.5%) out of the 27 ELISA IgM positive samples have T. gondii DNA. Genotypic analysis shows that, of the total 22 PCR positive samples, only 13 (59.1%) were of type II, 7 (31.8%) were of type III, and 2 (9.1%) were of an unknown genotype. It is obvious that the prevalence of both type II and III is high in rats. No reports have been available on T. gondii genotypes among rats in Riyadh region, and only little is known about its seroprevalence in rats. Future studies on T. gondii genotypes in rats using multi-locus markers is needed in Riyadh region, Saudi Arabia for better understanding of T. gondii pathogenesis and treatment in humans and animals.
Toxoplasmosis is a major public health concern, with raw or undercooked meat being the primary source of human infection. Knowledge regarding the molecular epidemiology of Toxoplasma gondii in cattle destined for human consumption in Korea is lacking. The present study aimed to genetically characterize the infectious strains of T. gondii. Overall, 455 cattle blood samples from 84 farms in the Gyeongnam-do (Province) were randomly collected in 2017. Nested PCR analysis revealed that only 3 (0.7%) samples were infected with T. gondii. The B1 gene sequence of T. gondii was observed to be similar (97.3-99.6%) to that of other T. gondii isolates. This is the first study to perform the molecular detection of T. gondii in cattle in Korea. Although the prevalence of infection was low, our findings suggest that cattle present a potential public health issue. It may be crucial to recognize the importance of T. gondii infection in cattle meat.
Toxoplasmosis, a neglected tropical disease caused by the protozoan parasite Toxoplasma gondii, occurs throughout the world. Human T. gondii infection is asymptomatic in 80% of the population; however, the infection is life-threatening and causes substantial neurologic damage in immunocompromised patients such as HIV-infected persons. The major purpose of this study was to investigate the seroprevalence of T. gondii infection in subjects infected with HIV/AIDS in eastern China. Our findings showed 9.7% prevalence of anti-T. gondii IgG antibody in HIV/AIDS patients, which was higher than in intravenous drug users (2.2%) and healthy controls (4.7%), while no significant difference was observed in the seroprevalence of anti-Toxoplasma IgM antibody among all participants (P>0.05). Among all HIV/AIDS patients, 15 men (7.7%) and 10 women (15.9%) were positive for anti-T. gondii IgG antibody; however, no significant difference was detected in the seroprevalence of anti-Toxoplasma IgG antibody between males and females. The frequency of anti-Toxoplasma IgG antibody was 8.0%, 13.2%, 5.5%, and 0% in patients with normal immune function ($CD4^+$ T-lymphocyte count ${\geq}500cells/ml$), immunocompromised patients (cell count ${\geq}200$ and <500 cells/ml), severely immunocompromised patients (cell count ${\geq}50$ and <200 cells/ml), and advanced AIDS patients, respectively (cell count <50 cells/ml), while only 3 immunocompromised patients were positive for anti-T. gondii IgM antibody. The results indicate a high seroprevalence of T. gondii infection in HIV/AIDS patients in eastern China, and a preventive therapy for toxoplasmosis may be given to HIV/AIDS patients based on $CD4^+$ T lymphocyte count.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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