This study was carried out to investigate the morphological changes of the oxytocin secreting neurons in age-related rat hypothalamus by means of immunohistochemistry. The experimental group was 20 aged female rats (Sprague-Dawley, 25~30 months), and the control group was 10 adult female rats (10 months). All animals were perfused transcardially with 4% paraformaldehyde-lysine-periocdate(PLP), and serial transverse brain sections($30{\mu}m$) were prepared by means of cryotome, and were stained with rabbit anti-oxytocin antisera immunohistochemically, using the free floating method and avidin-viotin peroxidase complex. The results were as followings. 1. The immunostained oxytocin secreting neurons were located at the paraventricular nucleus and supraoptic nucleus of age-related rat hypothalamus chiefly. 2. The numbers of oxytocin secreting neurons decreased at the paraventricular nucleus and supraoptic nucleus of age-related rat hypothalamus(p<0.01) 3. The oxytocin secreting neurons of age-related rat hypothalamus immunostained less than those of the adult rat hypothalamus, and the paraventricular nucleus immunostained greater than supraoptic nucleus in age-related rat. 4. The numbers and expansion of dendrite and axonal varicosities decreased in the age-related rat hypothalamus greatly.
Food intake is regulated by both central and peripheral mechanisms. In the central nervous, the hypothalamus acts for autonomic and endocrine homeostasis. The paraventricular nucleus(PVN) of hypothalamus is an imprtant site of interaction in central feeding pathways. Neuroepetide Y(NPY)is one of the most powerful neurochemical stimulants of food intake known. Also brain nitric oxide(NO), known as neurotransmitter, is involved in the mechanisms that regulate food intake. In this experiment, 24h fasting mice and anorexia mutant mice have been to examine the expression of NPY, which is the major neuropeptide increasing food intake. Double staining with NPY and nicotinamide-adenine-dinucleotide-phosphate diaphorase(NADPH-d), followed by immunohistochemical method and image analysis, have been used to observe coexisting neurons and the level of expression of each neurons. The results were as follows. 1) NPY-immunoreactivitys reduced immune response of the hypothalamus, particularly paraventricular nucleus(PVN), in anorexia mutant mice. Decreased level of NPY is assumed to be a major pathological factor in anorexia mutant mice. On the other hand, PVN in hypothalamus of fasting mice showed increased immunoreactivity which is in agreement of other researchers. 2) NPY and NADPH-d double staining revealed coexisting neurons in the cerebral cortex. Fasting mice had a tendency to have increased level of coexisting neurons compared to the control group. Compared to the control group, fasting mice express is not increase level of NPY-immunoreactivity, while anorexia mutant mice tended to have a decreased level.
A retrograde tracer, WGA-apo-HRP-gold, was injected into midline thalamic nuclei and subsequently orexin-A immunostaining was performed on the tuberal region of the hypothalamus in order to investigate orexinergic projections to the midline thalamus. Injection site was targeted within one specific region, i.e., paraventricular, centromedian, rhomboid, reuniens, or intermediodorsal nucleus, but it proved to be either one or a combination of these thalamic nuclei. The distribution of WG/orexin-double-labeled neurons exhibited a general pattern in that the majority of labeled cells were observed within the ventral portion of the lateral hypothalamus as well as the perifornical nucleus (PeF). A small number of double-labeled cells were also observed at the dorsomedial nucleus, the area dorsal to the PeF, dorsal portion of the lateral hypothalamus, and the posterior hypothalamus. These orexin-immunoreactive neurons might have wake-related influences over a variety of functions related with midline thalamic nuclei, which include autonomic control, associative cortical functions, and limbic regulation.
This study was attempted to investigate the topographical distribution, shape and immunoreactivity of growth hormone-releasing factor(GRF)- and somatostatin(SOM)-immunoreactive neurons in the hypothalamus of the Korean squirrels(Sciurus vulgalis coreae). For the light microscopical examination of immunohistochemistry, the brains were fixed with 4% paraformaldehyde solution by means of intracardiac perfusion. And the frozen sections($40{\mu}m$ thick) were stained immunohistochemically by ABC method. Distribution of GRF immunoreactive neurons($12-17{\mu}m$) was highest in the paraventricular nucleus, moderate in the periventricular and supraoptic nuclei, and low in the arcuate nucleus and lateral hypothalamic area. Their immunoreactive fibers were found very high in the median eminence, moderately in the supraoptic, paraventricular and periventricular nuclei, and low in the arcuate nucleus and lateral hypothalamic area. SOM immunoreactive perikarya($14-18{\mu}m$) were found moderately in the periventricular nucleus near the subependymal layer of the third ventricle, and low in the arcuate and suprachiasmatic nuclei. SOM immunoreactive fibers were found high in the median eminence, and moderately or low in the arcuate and periventricular nuclei.
Park, Joong Jean;Lee, Heung Kyung;Shin, Min Woo;Kim, Sung Jin;Noh, Seung Yeon;Shin, Jin;Yu, Woo Sung
Molecules and Cells
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제23권1호
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pp.88-93
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2007
Neuropeptide Y (NPY) is an orexigenic and hypothermic peptide. To understand its role in hypothermic conditions, male rats were placed in a $24^{\circ}C$ or $4^{\circ}C$ air chamber for 1.5 h. The expression of c-Fos protein, and NPY mRNA and protein, was analyzed in the hypothalamus 1 h-2 h later. The cold treatment increased the number of c-Fos-immunoreactive cells in the paraventricular hypothalamic nucleus (PVN) and arcuate nucleus (ARC). At the same time it decreased the density of NPY-immunoreactive components in the PVN, dorsomedial hypothalamic nucleus and ARC, as well as of NPY transcripts in the PVN and ARC. No colocalization of c-Fos with NPY was detected. These results suggest that short-term cold exposure should reduce indirectly NPY production in some hypothalamic nuclei to facilitate thermogenesis without inducing feeding behavior.
The present study was conducted to identify the mechanism about the regulation of appetite by examining the expression patterns of neuropeptide Y in the hypothalamus of mice either fasting mouse for 24 hours or with anorexia mutant mouse. In order to investigate the patterns of expression of neurpeptide Y, immunohistochemistry was employed for measurements at the tissue level, along with the molecular biological techniques of reverse transcription polymerase chain reaction(RT-PCR) and dot blotting. The results of this study are as follows. The level of expression of neruopeptide Y, a neuropeptide known to enhance appetite, was shown to be lowered in the arcuate nucleus(ARC), paraventricular nucleus(PVN), lateral hypothalamic area(LHA), and dorsomedial hypothalamic nucleus(DMN) in both the fasting and anorexia mutant groups when measured via immunohistochemistry, a tissue-level method. RT-PCR and dot blotting, the molecular biological methods employed in this study, revealed that the level of neuropeptide Y mRNA in the entire hypothalamus was similar in the control and fasting groups and lower in the anorexia mutant group. The results of the present study showed that while the levels of expression of the neuropeptide Y in the various hypothalamic regions studied did not exhibit regular increases or decreases when measured immunohistochemically. But the entire hypothalamus via molecular biological methods showed that the changes in these levels were more definite in the anorexia mutant group than in the fasting group.
We investigated the interaction of serotonin and galanin (GA) by a double immunostaining method in the Japanese quail. Serotonin-immunoreactive (IR) cells were located in the paraventricular organ (PVO) and infundibular nucleus (IF). The number of the cells under short-day photoperiod (SD) was less in the dark phase than in the light phase. GA-IR cells were found in the PVO, IF and median eminence. The number of GA-IR cells in SD was significantly greater than that in long-day photoperiod (LD). Numerous GA- IR varicose fibers ran along serotonin- IR cell bodies and nerve fibers in the PVO and IF of the same sections. Very few serotonin-IR fibers ran along GA-IR cell bodies and GA-IR nerve fibers in the ventral part of the IF. The present results suggest that the possibility of functional interaction takes place between serotonin- and GA- IR neurons in the PVO and IF.
본 연구에서는 침의 면역조절작용을 통한 염증반응 억제효과를 연구하기 위하여 내독소를 주입한 흰쥐의 시상하부에서 염증반응의 중추인 방실핵의 신경활성에 미치는 영향을 관찰하였다. 흰쥐의 미정맥에 LPS와 생리식염수를 각각 주입하고 군에 따라 양측 소부(HT8)나 족삼리(ST36)에 1분간 침치료를 각각 시행하였다. C-Fos는 신경활성을 자극하는 초기단계에 발현되는 유전자로서 신경계의 특정부위의 활성도를 측정하는 지표로 널리 사용되고 있다. 본 연구자는 침자극이 LPS로 인한 염증반응에 미치는 영향과 그 기전을 알아보기 위해 면역조직화학염색의 방법을 이용하여 대뇌 시상하부의 방실핵에서 c-Fos 면역활성을 측정하였다. LPS를 주입한 군의 방실핵에서 생리식염수를 주입한 군에 비해 c-Fos 면역활성이 유의하게 증가한 반면 소부에 자침했을 때 LPS에 의해 증가된 c-Fos 면역활성이 유의하게 감소하였다. 족삼리에 자침한 군에서는 유의한 변화가 나타나지 않았다. 결론적으로 소부 침치료는 LPS로 인해 증가된 방실핵의 신경활성을 효과적으로 감소시켰고 이는 침의 면역조절 및 탁월한 염증억제 효과를 보여주는 결과일 뿐 아니라 침의 인체 항상성 유지를 통한 치료기전에 대한 향후 연구의 중요한 실마리를 제공해주고 있다고 사료된다.
This study was carried out to investigate the effects of electrical stimulation on the change oxytocin(OT) immunoreactive cells in the hypothalamus of the male SD rats. Fifteen healthy and normal male rats were divided into three groups, 5 SD rat in each group. The one group has been stimulated by electro-acupuncture(EA, 2Hz) for 30 min and the other group by EA for 1hr 30 min and control group has not been stimulated. The results were summarized as follows. OT immunoreactive cells were found in the Paraventricular nucleus (PVN), Supraoptic nucleus(SON) and Lateral Magnocellular Area(LMA). The number of OT immunoreactive cells of PVN were significantly increased after 30 min as compared with control group (p<0.05) and were also significantly increased after 1hr 30min than 30 min(p<0.05). The number of OT immunoreactive cells of SON were significantly increased after 30 min and 1hr 30 min(p<0.05) as compared with control group, but decreased after 1hr 30 min than 30 min. The number of immunoreactive hells of LMA significantly increased after 30 min(p<0.05) as compared with control group, but significantly decreased after 1hr 30 min than 30 min(p<0.05). These results show that OT is released into the hypothalamus in response to electrical stimulation.
고양이의 시상하부내 SON과 PVN에서 VP분비신경원과 OT분비신경원의 형태와 분포를 관찰하기 위해서 면역조직화학적 반응을 시행하였다. 광학 및 전자 현미경적 관찰에 의하면 VP분비신경원과 OT분비신경원의 형태 차이는 없었다. 이들의 형태는 방추형, 타원형 그리고 원형이었으며 크기는 25-40mm으로 나타났다. SON은 시삭위에 능형의 형태로 나타나고 OT분비신경원과 VP분비신경원의 비율은 1:2.4이며 PVN은 제3뇌실을 따라 삼각형 모양으로 나타나고 VP분비신경원과 OT분비신경원의 비율은 1:1.6으로 나타났다 전자현미경적 관찰에 의하면 VP분비신경원과 OT분비신경원에서 과립형질내세망, 사립체, 골지장치, 그리고 미세소관 등이 특히 잘 발달되어 있음을 관찰할 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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